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過(guò)表達(dá)PRDM14非小細(xì)胞肺癌腫瘤細(xì)胞株的構(gòu)建


盧亞楠,劉思瓏,麻雨晴,劉夢(mèng)琪,齊悅

北京城市學(xué)院生物醫(yī)藥學(xué)部


摘要:

肺癌是目前全球發(fā)病率和病死率最高的惡性腫瘤之一。本研究通過(guò)克隆人的PRDM14基因,構(gòu)建過(guò)表達(dá)PRDM14的真核表達(dá)載體,轉(zhuǎn)染NCI-H1975細(xì)胞后得到高表達(dá)PRDM14的非小細(xì)胞肺癌細(xì)胞株。以人胚胎干細(xì)胞cDNA為模板,PCR擴(kuò)增PRDM14基因編碼序列,將其插入pcDNA3.1真核表達(dá)載體,經(jīng)雙酶切和測(cè)序驗(yàn)證后,將重組質(zhì)粒轉(zhuǎn)染到NCI-H1975肺癌細(xì)胞中,采用Western blot檢測(cè)目的蛋白表達(dá)情況。結(jié)果表明,pcDNA3.1-prdm14重組載體構(gòu)建成功,且目的蛋白能夠在NCI-H1975細(xì)胞中正常表達(dá)。構(gòu)建的過(guò)表達(dá)PRDM14非小細(xì)胞肺癌細(xì)胞株可以為后續(xù)研究該基因?qū)Ψ切〖?xì)胞肺癌的調(diào)控作用及非小細(xì)胞肺癌的靶向藥物研究等提供實(shí)驗(yàn)材料。pdf


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